miR—143在宫颈癌组织中的表达

一、研究资料和方法 　　1.研究的资料 　　笔者选取了2016年7月份到2017年7月份江苏省盐城市第一人民医院治疗的33例宫颈癌患者的数据，经实时荧光定量的聚合酶链反应（RT-PCR）对宫颈组织与内瘤变组织中miR-143表达水平进行检测。所选患者都没有实施放疗与化疗，年龄最小和年龄最大患者分别为33岁与78岁，年龄的均值是（52±2.53）岁。经病理分级得出，有24例患者为G2期，9例患者为G3期。 　　2.研究的方法 　　（1）总RNA提取 　　先选取零下80℃保存的相关宫颈组织，运用RNAisoPlus的试剂提取组织中的RNA，进行DEPC的水溶解，然后用1%甲醛变性琼脂糖凝胶的电泳对RNA的完整性进行检测，最后用紫外分光的光度计对RNA纯度与浓度进行检测。如果A260/A280在1.8～2之间，则需要实施后续的试验。 　　（2）2RT-PCR的检测 　　miR-143通过microRNA的逆转录试剂盒实施逆转录，具体反应体系是20微升，主要包含1微升的两倍TotalRNA、RNaseFreedH2O补足20微升、10微升miRNAReactionBufferMix、2微升miRNAPrimeScriptRTEnzymeMix以及2微升0.1%BSA。反應发热条件为85℃、5秒；37℃、60分钟，将产物储存在零下20℃条件下，冻存备用。通过SYBRPremixExTaqTMⅡ实施PCR的扩增反应，其反应体系是20微升，主要包含6微升dH2O、10微升SYBRPremixExTaqTMⅡ、0.4微升ROX参比资料Ⅱ（50×）、0.8微升PCR正向引物（10μmol）、2微升DNA模板以及0.8微升PCR反向引物（10μmol）。具体反应条件为60℃、30秒；95℃、30秒以及95℃、3秒，一共进行四十个循环。内参照的基因和目的基因在扩增效率一致情况下，需要把U6当作内参照，对循环的阈值（Ct值）进行测定，同时对ΔCt值进行计算，一元特卖零元购!!喜欢这种收获的感觉，公式为ΔCt等于miR-143Ct-U6Ct，通过2-ΔCt代表miR-143相对表达的水平。 　　3.数据统计 　　笔者把本次研究得到的数据全部记录于一个表格之中，并构建相应的数据库，于SPSS20.0统计软件中实施计数资料和计量资料的处理。应用百分率来描述计数资料，经卡方x2进行检验，如果所得数据进行对比以后，有明显的差异，可使用P<0.05来表示。 　　二、研究的结果 　　1.在不同的宫颈组织中，miR-143表达的水平 　　在正常的宫颈组织中，miR-143表达量为（1.01±0.24），在CIN的组织中，miR-143表达量为（0.94±0.28），在宫颈鳞状的细胞癌组织中，miR-143表达量为（0.31±0.09）。在正常的宫颈组织以及CIN组织中，miR-143表达量相比以后，数值比较接近，对比显示有明显的差异，P>0.05；在正常的宫颈组织以及CIN组织中，miR-143表达量比较大，与宫颈鳞状的细胞癌组织中的相比，有明显的差异，P<0.05。 　　2.miR-143表达和临床病理的特征相关性 　　在宫颈癌的组织中miR-143表达量和病理分级、肿瘤直径、临床分期以及淋巴结转移相关（如表1所示）。 　　三、研究讨论 　　相关研究指出，在很多恶性肿瘤中，miRNas会表现出异常，而在宫颈癌的组织中，miRNA的表达变化可以辅助调控细胞周期的调节通路，并且细胞通路激活后，可以抑制其他的靶基因，所以miRNA表达可以当作宫颈癌潜在的标志物。本次研究中显示，在正常的宫颈组织以及CIN组织中，miR-143表达量相比以后，数值比较接近，对比显示有明显的差异，P>0.05；在正常的宫颈组织以及CIN组织中，miR-143表达量比较大，与宫颈鳞状的细胞癌组织中的相比，有明显的差异，P<0.05；在宫颈癌的组织中miR-143表达量和病理分级、肿瘤直径、临床分期以及淋巴结转移相关。 　　综上可知，在宫颈癌的组织中，miR-143表达量与病理分级、肿瘤直径、临床分期以及淋巴结转移相关。因此，检测miR-143表达量能够为临床治疗提供依据。 　　参考文献： 　　[1]贾伟利，郭光辉，刘雄伟等.血清microRNA在宫颈癌诊断中的诊断价值[J].心理医生，2015，（11）. 　　[2]陈集敏，王康，王圣坦.不同程度宫颈病变组织中miR-143的表达与临床病理特征的关系[J].中国妇幼保健，2015，（4）. 　　（作者单位：屈薇娜安徽省滁州城市职业学院；任新萍江苏省盐城市第一人民医院妇科） 头条新闻 http://www.itvgov.cn